酶(GLS)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
GLS(EC 3.5.1.1)是酰胺基水解酶,催化天冬酰胺水解成和氨,在氮素代謝中具有重要調(diào)控作用。
測定原理:
GLS催化水解成L-和氨,利用奈氏試劑檢測氨增加的速率,即可計算其酶活性。
需自備儀器和用品:
臺式離心機、酶標(biāo)儀、96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、冰和雙蒸水。
粗酶液提取:
1、細(xì)胞或組織樣品的制備:
培養(yǎng)細(xì)胞:先收集或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
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