-N-脫甲基酶(ERND)測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100管/48S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
細胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的酶系,在外源物質代謝中,尤其是和毒物的代謝,具有重要作用。ERND在P450酶系中相當于CYP2B亞型,與代謝的去甲基化密切相關。CYP2B具有催化底物形成非活性易于排泄的代謝產物而具有作用,也可使某些經CYP2B代謝活化。測定原理:
ERND催化釋放甲醛,通過Nash比色測定甲醛含量,即可計算出ERND活性。自備儀器和用品:
普通離心機,超速離心機、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和冰。粗酶液提取:
1、除去細胞核,線粒體等大分子物質:稱約0.5g組織,加入1mL試劑一,冰上充分研磨,10 000g 4℃離心30min,取上清液,轉入超速離心管中。2、粗制微粒體:100 000g,4℃,離心60min,棄上清液。
3、除血紅蛋白等雜質:向步驟2的沉淀中加1mL試劑一,蓋緊后充分震蕩溶解,100 000g離心30min,棄上清液。
4、終微粒體:向步驟3的沉淀中加試劑二0.5mL,充分震蕩溶解,即粗酶液,待測。該待測液需當用。
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