
本發(fā)明涉及一種固定化酶水解粗奶酪和超濾膜分離方法連續(xù)生產(chǎn)酪蛋*酸肽,其步驟包括:a.的提取;b.制備固定化反應(yīng)柱;c.水解粗奶酪;d.超濾膜分離提純酪蛋*酸肽(CPP);e.將CPP的超濾液進(jìn)行柱層析。本發(fā)明工藝設(shè)計(jì)合理、操作性強(qiáng),生產(chǎn)過(guò)程短,中間產(chǎn)物濃度高,生產(chǎn)能耗低:主要分離純化過(guò)程均采用常溫處理,干燥過(guò)程蒸發(fā)量少,極大降低了生產(chǎn)中的能耗,節(jié)約了成本。產(chǎn)品經(jīng)真空濃縮、噴霧干燥得到,其主要成份為小分子生物活性多肽,分子量在2000~6000范圍的多肽占多肽的45%以上。
一種固定化酶水解粗奶酪和超濾膜分離方法連續(xù)生產(chǎn)酪蛋*酸肽,其步驟分為:a.的提取方法i.將新鮮牛胰臟剔出脂肪、結(jié)締組織后,浸入*酸銨溶液,攪拌,壓濾,得到浸提濾液;ii.在浸提濾液中加入固體*酸銨,攪拌、靜置、去沉淀,過(guò)濾后得到上清液;iii.上清液調(diào)pH值至3.0以下,保持溶液中的*酸銨濃度在3.0~3.5mol/L,攪拌均勻后靜置沉淀,
棄上清,沉淀物為原粗品;iv.原粗品加入*,CaCl2,溶解、靜置活化,再加入*,攪拌、靜置、沉淀,過(guò)濾后即得;b.制備固定化反應(yīng)柱弱堿性苯乙稀陰離子樹(shù)脂加入2.5%*,在10℃~20℃下交聯(lián)反應(yīng)10~12小時(shí),再加入1~4%,在10~15℃下固定化20小時(shí),裝入直徑∶高度=1∶10的不銹鋼反應(yīng)柱;c.水解粗奶酪粗奶酪用10~15倍水在55~60℃溶脹1小時(shí),以1mol/L的NaOH調(diào)整pH值不超過(guò)8.0,溶解后,經(jīng)過(guò)濾、分離脫脂后的蛋白質(zhì)溶液在40℃~60℃下以10L/min的速度逆向通過(guò)固定化酶反應(yīng)柱,蛋白質(zhì)溶液保持與固定化酶循環(huán)接觸時(shí)間為3~5小時(shí);然后將水解液經(jīng)熱交換柱冷卻至室溫,壓濾除去沉淀,經(jīng)由硅藻土過(guò)濾機(jī)澄清后得到CPP水解液;
d.超濾膜分離提純酪蛋*酸肽(CPP)CPP水解液經(jīng)過(guò)超濾膜過(guò)濾設(shè)備兩次分離,其工藝參數(shù) 次分離膜截流分子量上限≤50000,膜起始?jí)毫?Bar,終止壓力10Bar,循環(huán)流量200L/h?r,平均循環(huán)時(shí)間2~5小時(shí);第二次超濾膜分離膜截流分子量下限≤1000,膜起始?jí)毫?Bar,終止壓力15Bar,循環(huán)流量150L/hr,平均循環(huán)時(shí)間3~6小時(shí);e.將CPP的超濾液進(jìn)行柱層析分離后的水解液用20~40目的顆粒活性炭柱進(jìn)行層析吸咐,流速為20L/hr,壓力為1.2Bar~1.5Bar,然后將水解液經(jīng)低溫真空濃縮,真空度40mmHg~60mmHg、溫度30℃~40℃,至固形物含量30%~40%,再?lài)婌F干燥,壓力為6Ba?r,溫度為60℃~70℃,即得到酪蛋*酸肽(CPP)產(chǎn)品。























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