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BE-Gradient微流控芯片用于研究多球腫瘤細胞在FBS的趨化反應

2026年03月11日 12:22:38      來源:廣州虹科電子科技有限公司 >> 進入該公司展臺      閱讀量:9

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西班牙薩拉戈薩大學科學家采用BE-Gradient微流控芯片觀測多球細胞的化學遷移情況,主要研究了OSC-19多球細胞(OSC-19:人舌鱗癌細胞)在FBS(胎牛血清)的趨化反應。探究方向如下:1、通過橫向微通道探究不同化合梯度條件下的趨動行為。2、對比OSC-19多細胞在微流控系統(tǒng)(膠原包被)和在孔板中的球狀體遷移情況。3、證明了在對趨化梯度的反應中OSC-19單細胞培養(yǎng)時與多細胞球體培養(yǎng)時表現(xiàn)出不同的響應機制。

前言

趨化運動是指細胞能夠感受到外界化學物質的濃度梯度,并沿著濃度梯度的方向所做的定向運動。趨化作用在許多病癥中起著關鍵作用,包括炎癥和自身免疫性疾病以及癌癥,還有許多發(fā)育和組織重塑過程,包括胚胎生長和傷口愈合。因此,能夠詳細研究趨化過程的技術是藥物發(fā)現(xiàn)和基礎生物學的重要工具。

一、瓶頸挑戰(zhàn)

許多不同的方案被用來研究細胞遷移和趨化作用。Boyden Chamber Assay:Boyden小室法是目前細胞遷移和侵襲實驗技術的方法之一。雖然這種方法用途廣泛,但它有一些局限性:例如,它不能直接觀察遷移過程中的細胞。除此之外,還有一些研究細胞遷移和趨化作用其他物質或方法,包括under-agarose凝膠、Agarose Spot、Zigmond chamber、Dunn chamber和Insall chamber檢測等。這些檢測方法各有其優(yōu)點,但它們通常都不能研究隨著時間變化的化學梯度對細胞的影響。 此外,梯度控制和重現(xiàn)性可能是一個挑戰(zhàn)。這些缺點都可以通過使用微流控系統(tǒng)來克服,微流控系統(tǒng)已經成為研究趨化性的有力工具。

雖然現(xiàn)有技術觀察單細胞的趨化反應裝置是非常有效,例如Jeon NL的預混器梯度發(fā)生器,但它們在某種程度上與更現(xiàn)實的細胞遷移情況有距離。細胞是多細胞系統(tǒng)的一部分,往往多細胞的趨化反應與單細胞展現(xiàn)不一樣的遷移機制。研究表明,固體腫瘤細胞可表現(xiàn)出與單個細胞不同的機制進行遷移和入侵。例如,膠質瘤為可孤立的侵襲性腫瘤,而上皮細胞似乎是通過集體運動侵襲。

這就跟現(xiàn)實情況造成了一定的差異。更重要的是,現(xiàn)有技術往往都不允許對多細胞的集體遷移,這是一塊研究的空白。

二、解決方案

同時,本文采用BE-Gradient微流控芯片作為核心裝置進行研究。該裝置由一個室(模擬細胞培養(yǎng))和兩條包含3個通向中心室的橫向通道(模擬血管)組成。在中心室容納包含細胞的水凝膠,兩側通過灌注不同濃度的介質,通過水凝膠多孔結構對流體的阻力作用,在橫向微通道形成不同的濃度梯度。

BE-Gradient微流控芯片內部結構和參數(shù)示意圖

三、BE-Gradient微流控芯片中的熒光成像和顯微成像表現(xiàn)

在FBS化學梯度下OSC-19多細胞的顯微形貌圖
在FBS化學梯度下OSC-19多細胞的熒光成像圖
(a)OSC-19單細胞的顯微圖(b)OSC-19單細胞的趨化運動分析(c)OSC-19單細胞的熒光成像圖

注:本文圖片部分摘引于文獻:Ayuso J M , Ba Sheer H A , Rosa M , et al. Study of the Chemotactic Response of Multicellular Spheroids in a Microfluidic Device[J]. Plos One, 2015, 10(10):e0139515.

四、其他應用

  • 3D細胞培養(yǎng):首先將細胞混合在液相水凝膠中,然后將它們引流至室中。水凝膠聚合完成后,通過橫向通道灌注具有不同濃度化合物的培養(yǎng)基,并實時監(jiān)測效果。
  • 2D細胞培養(yǎng):適用于貼壁細胞,不僅可以在室中檢測,也可以在橫向通道中培養(yǎng)。

應用案例:細胞/球狀體入侵和遷移、血管新生、轉移、血管生成、趨化、缺血、細胞分化或氧化壓力、微型器件內的壞死核心生成、葡萄糖梯度實驗。

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