食物的蛋白質(zhì)含量可通過多種方法確定，用于蛋白質(zhì)分析的凱氏定氮法和氮燃燒法基于氮測定，這兩種方法都是用于食品營養(yǎng)標(biāo)簽的目的，雖然凱氏定氮法已被廣泛使用了一百多年，但最近在許多情況下使用氮燃燒法方法的自動化儀器正在取代凱氏定氮法的使用。
凱式定氮儀程序測量樣品的氮含量，然后可以假設(shè)所分析的特定食物的蛋白質(zhì)與氮的比率，來計(jì)算蛋白質(zhì)含量，凱氏法程序基本上可分為三個(gè)部分消化，蒸餾，滴定。在消化步驟中，有機(jī)氮在催化劑存在下在約370攝氏度轉(zhuǎn)化為銨。在蒸餾步驟中，用NaOH將消化的樣品堿化，并以NH3蒸餾出氮?dú)狻Ｔ揘H3被捕獲在硼酸溶液中。通過用標(biāo)準(zhǔn)HCl溶液滴定，來量化該溶液中氨氮的量，通過分析進(jìn)行試劑空白，并從每次測定中減去該空白所需的HCl滴定劑的體積。
一、消化
打開消化塊并加熱到適當(dāng)?shù)臏囟龋瑴?zhǔn)確稱重約0.1克玉米粉，記錄重量，將玉米粉放入消化管中，重復(fù)兩個(gè)樣本。用玉米粉向每個(gè)管中加入一種催化劑片劑和適當(dāng)體積的濃硫酸。樣品中使用的一個(gè)催化劑片劑+體積的硫酸+稱重紙。將消化管架放在消化塊上，蓋上消化塊，打開排氣系統(tǒng)，讓樣品消化直至消化完成，樣品應(yīng)清晰，沒有燒焦的材料。從消化塊中取出樣品，并在排氣系統(tǒng)仍然打開的情況下冷卻。用適量的dd水小心稀釋消化液。旋轉(zhuǎn)每個(gè)管。
二、蒸餾
按照適當(dāng)?shù)某绦騿诱麴s系統(tǒng)，將適量的硼酸溶液分配到接收瓶中，將接收瓶放在蒸餾系統(tǒng)上，確保來自樣品蒸餾的管子浸沒在硼酸溶液中，將樣品管放置到位，確保其牢固就位，然后進(jìn)行蒸餾直至完成，在該蒸餾過程中，將一定體積的NaOH溶液輸送到管中，蒸汽發(fā)生器將樣品蒸餾一段時(shí)間，完成一個(gè)樣品的蒸餾后，繼續(xù)使用新的樣品管并接收燒瓶，完成所有樣品的蒸餾后，按照制造商的說明關(guān)閉蒸餾裝置。
三、滴定
如果使用自動pH計(jì)滴定系統(tǒng)，按照制造商的說明校準(zhǔn)儀器，將磁力攪拌棒放入接收瓶中，并將其放在攪拌盤上，滴定時(shí)保持溶液快速攪拌，但不要讓攪拌棒碰到電極，滴定每個(gè)樣品并空白至終點(diǎn)pH為4，記錄使用的HCl滴定劑的體積，如果使用比色終點(diǎn)，將磁力攪拌棒放入接收瓶中，將其置于攪拌板上，并在滴定時(shí)保持溶液劇烈攪拌，滴定每個(gè)樣品并用標(biāo)準(zhǔn)化的HCl溶液空白至個(gè)微弱的灰色。記錄使用的HCl滴定劑的體積。
文章來源：上海靳瀾儀器制造有限公司
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