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凝膠色譜是以多孔凝膠為固定相,利用凝膠孔的空間尺寸效應(yīng),使不同大小的分子達到分離的一種高效液相色譜(HPLC)方法。其分離機理類似于分子篩效應(yīng),大體積分子只能滲入少量大孔,在固定相中所經(jīng)歷的路徑較短,先流出。所有孔隙都不能進入的大體積分子,不被保留,在死體積處流出。因此,溶質(zhì)按分子體積從大到小依次流出色譜柱。在凝膠色譜中,流動相只起溶解樣品的作用,以有機溶劑為流動相的凝膠滲透色譜(GPC)應(yīng)用較多,而以水為流動相的凝膠過濾色譜的應(yīng)用相對較少,這主要是因為水溶性大分子不僅可以溶于水,通常也能溶于有機溶劑中。甲苯和二甲基甲酰胺等非極性有機溶劑是常用的流動相。在凝膠色譜中,固定相表面與溶質(zhì)分子間不存在化學(xué)相互作用,即固定相是惰性多孔材料。