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摘要:在ACQUITY UPC2 TM系統(tǒng)上使用沃特世(Waters?)超高效合相色譜技術(shù)分離典型跨膜肽-短的方法,可得到線性和可重復(fù)的結(jié)果,測(cè)定的OTC制劑濃度為標(biāo)示量的98.4%,是準(zhǔn)確、高精度分析短的方法。
短是由芽孢桿菌產(chǎn)生的一種常見(jiàn)和已被良好表征的跨膜肽物質(zhì),被用作對(duì)抗革蘭氏陽(yáng)性和某些革蘭氏陰性細(xì)菌的局部用抗生素。用反相液相色譜(RPLC)分析疏水性肽和蛋白質(zhì)難度很大。因?yàn)槿芤褐薪?jīng)常需要使用洗滌劑保持疏水性物質(zhì)的穩(wěn)定性,而這些洗滌劑容易發(fā)生聚集或沉淀,嚴(yán)重影響它們的回收,這些因素及其他原因使得難以用RPLC分離疏水性肽和蛋白質(zhì)。
沃特世解決方案:ACQUITY UPC2系統(tǒng);ACQUITY? SQD;ACQUITY UPC2 CSH氟苯基色譜柱;EmpowerTM 3軟件。
實(shí) 驗(yàn)
除非另有說(shuō)明,以下是用于所有色譜最終方法的條件。
1.UPC2測(cè)試條件
UPC2系統(tǒng): ACQUITY UPC2;檢測(cè)器:PDA、ACQUITY SQD PDA@280nm,分辨率為6nm(補(bǔ)償400~500nm);色譜柱:ACQUITY UPC2 CSH氟苯基,3.0mmx100mm,1.7