2.2取一張層析紙,在端底向上1cm處、平行相隔1cm、用鉛筆畫出將要點樣的五個+字線或點五個小點。
2.3用四支毛細管分別沾取1、2、3、4號對照液少許(毛細管不多于0.5厘米容積距離)點在層析紙1、2、3、4號+字線上,另取1支毛細管沾取靜置后已經染色的乙酸乙酯樣品溶液(體積不限),將其點在層析紙5號+字線上。(溶液的顏色較淺時,可在每次點樣斑點揮干后重復點樣),斑點直徑控制在5毫米內。
3 測定:取一個約200ml的燒杯,加入約5ml展開劑,將層析紙(樣品端朝下)插入展開劑中靠在杯壁上,待展開劑延層析紙向上平行展開至約7厘米處時取出層析紙,觀察結果。
4 判斷:在本實驗條件下,如果樣品在展開軌跡中出現斑點,其斑點展開(向上跑)的距離與某一對照液展開后的斑點距離相等、形狀相同、顏色雖淺卻相近時,即可判斷樣品中加入了這一色素。
5 說明:
5.1本方法能夠判定樣品中是否加入了目視可見的(如圖:由左至右1、2、
3、4號),同時對判斷樣品中是否加入了其它非食用色素也有一定的參考價值,論據在于標準允許使用的辣椒紅天然色素以及允許使用的合成色素在本方法展開過程中不會形成斑點,對出現異常斑點的樣品,可用高效液相色譜儀進一步確正。注意:允許使用的紅曲天然色素在展開后的前沿頂端會形成斑點,需要時可用對照液作對比實驗。
5.2對照液的點樣量不要太多,否則會產生拖尾現象。在用毛細管沾取對照液后,可在棉花球或一張廢棄的層析紙上沾棄多余的溶液,使毛細管留有不超過0.5厘米距離的溶液,將其一次性點到層析紙+字線上。
5.3展開劑的使用應適量,液面高度應控制在斑點以下,展開過程中層析紙不能傾倒,每展一張層析紙更換一次展開劑。
5.4環境溫度會影響斑點的展開距離。溫度低時,斑點的展開距離短;溫度高時,斑點的展開距離長;當斑點展開距離較短(2厘米以內)時,可在展開劑中加入乙酸乙酯(5ml展開劑加數滴乙酸乙酯);當斑點距離過大,達到頂端時,應換一個溫度較低的環境操作。
5.5檢測的樣品數量較多時,不必每張層析紙上都點對照液,可一次點5個樣品,當展開過程中出現斑點后,需要重復實驗時再點對照液。
5.6現場檢測出的陽性樣品應送實驗室確認,精確定量需要采用高效液相色譜儀。
5.4保質期1年,生產日期見包裝處。
6 試劑盒組成: (1))層析紙1袋; (2)展開劑2瓶 ; (3)毛細管1管;(4)1、2、3、4號對照液各1支,
7 自備試材:10ml具塞試管或比色管,200ml燒杯,分析純--乙酸乙酯,量尺和鉛筆。
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