S轉移酶(GST)測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
GST是一種具有多種生理功能的蛋白質家族,主要存在于細胞質內。GST是體內酶系統的重要組成部分,主要催化各種化學物質及其代謝產物與GSH的巰基共價結合,使親電化合物變為親水物質,易于從膽汁或尿液中排泄,達到將體內各種潛在或具備毒性的物質降解并排出體外的目的。因此,GST在保護細胞免受親電子化合物的損傷中發揮著重要的生物學功能。此外,因為GST具有GSH-Px活性,亦稱為non-Se GSH-Px,具有修復氧化破壞的大分子如DNA、蛋白質等的功能。注意,GST催化的反應減少GSH含量,但是不增加GSSG含量。
測定原理:
GST催化GSH與CDNB結合,其結合產物的光吸收峰波長為340nm;通過測定340nm波長處吸光度上升速率,即可計算出GST活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
粗酶液提取:
1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。
2.按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體:直接測定。
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