酰基轉移酶(AAT)測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
AAT是一個多功能蛋白大家族,主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應,在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。測定原理:
AAT催化乙酰CoA轉移乙酰基到丁醇,釋放的CoA還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測定412 nm吸光度增加速率可計算AAT活性。自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、無水乙醇。粗酶液提取:
1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。
2.按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3.液體:直接檢測。
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