
高純中溫α-的生產(chǎn)方法,包括種子培養(yǎng)、發(fā)酵產(chǎn)酶和后處理提純各階段,步驟如下:一、材料準(zhǔn)備,購(gòu)買枯草芽孢桿菌的甘油管菌種,準(zhǔn)備發(fā)酵培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基;二、種子培養(yǎng),開始時(shí)進(jìn)行平皿培養(yǎng),然后進(jìn)行搖瓶培養(yǎng),*后在種子罐中培養(yǎng);三、發(fā)酵產(chǎn)酶,發(fā)酵溫度為31-35℃,pH為6.6-6.8,通風(fēng)比1:0.4-0.6;基礎(chǔ)料加補(bǔ)料工藝及脈沖進(jìn)氨;四、后處理提純,即發(fā)酵液→*次絮凝處理→第二次絮凝處理→板框壓濾→超濾→成品加穩(wěn)定劑、防腐劑處理→二次升溫→成品。本發(fā)明有效的解決產(chǎn)品收得率低、易沉淀及微生物指標(biāo)不合格的問(wèn)題,使產(chǎn)品質(zhì)量抽檢合格率100%,使發(fā)酵活力提高近2倍,發(fā)酵酶活達(dá)到1300u/ml以上,純度提高了3倍,并且產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。
高純中溫α?的生產(chǎn)方法,包括種子培養(yǎng)、發(fā)酵產(chǎn)酶和后處理提純各階段,其特征在于,步驟如下:一、材料準(zhǔn)備,購(gòu)買枯草芽孢桿菌的甘油管菌種,該菌株呈短桿狀、兩端鈍園、單獨(dú)或成鏈狀,在淀粉培養(yǎng)基菌落園形,表面光滑濕潤(rùn)、有粘性、產(chǎn)孢子較少;發(fā)酵培養(yǎng)基:
各成分重量比例如下:豆餅粉3?5%、玉米漿1?2%、玉米淀粉16?20% 氫二鉀0.2?0.4% 二氫鉀0.1?0.2% 酸鎂0.05?0.15% 酸錳0.01?0.03%、消泡劑0.2?0.4%,其余為水;種子培養(yǎng)基:各成分重量比例如下:蛋白胨0.5?1.5%,牛肉膏0.2?0.4%,酵母膏0.1?0.3%,葡萄糖0.05?0.15%,*鈉0.05?0.15%,其余為水;二、種子培養(yǎng),開始時(shí)進(jìn)行平皿培養(yǎng),然后進(jìn)行搖瓶培養(yǎng),*后在種子罐中培養(yǎng),種子罐0.1mpa*20?40分鐘,培養(yǎng)條件:PH6.3?7.0,溫度31?35℃,25?30hr,轉(zhuǎn)速240轉(zhuǎn)/分,通風(fēng)比1∶0.2,種子生長(zhǎng)進(jìn)入對(duì)數(shù)期,鏡檢菌絲密集,大部分?jǐn)嗔殉蓛陕?lián)菌,無(wú)雜菌,PH上升至高峰向下回落0.1時(shí)即可移入發(fā)酵罐;三、發(fā)酵產(chǎn)酶,工藝條件,發(fā)酵溫度為31?35℃,PH為6.6?6.8,通風(fēng)比1∶0.4?0.6;基礎(chǔ)料加補(bǔ)料工藝及脈沖進(jìn)氨;流加通氨調(diào)節(jié)PH至菌絲生長(zhǎng)代謝*佳值,
流加補(bǔ)料,在補(bǔ)料中加入含氮源的營(yíng)養(yǎng)基,發(fā)酵罐轉(zhuǎn)速160轉(zhuǎn)/分,發(fā)酵過(guò)程中,當(dāng)PH下降至6.5時(shí)開始通*,DE值下降至20,PH不再下降,有上升趨勢(shì),開始流加補(bǔ)料,每小時(shí)流加補(bǔ)料一次,將DE值控制在10~20之間,發(fā)酵至45?55小時(shí),細(xì)胞空胞率達(dá)80%以上時(shí),PH值上升到7.2,酶活力不再增長(zhǎng),鏡檢菌絲大部分死亡時(shí),即可結(jié)束發(fā)酵,發(fā)酵酶可達(dá)1250?1350u/ml,發(fā)酵結(jié)束轉(zhuǎn)入后處理提純;四、后處理提純,即發(fā)酵液→*次絮凝處理→第二次絮凝處理→板框壓濾→超濾→成品加穩(wěn)定劑、防腐劑處理→二次升溫,一次升溫72?78℃、保溫時(shí)間30分鐘,二次升溫62?68℃、保溫時(shí)間60分鐘,→成品。





















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