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固定相按孔隙深度又分為表面多孔型（薄殼型）和全多孔型。表面多孔型的基體是球形玻璃珠，在玻璃表面包覆一層數微米厚的多孔活性物質如硅膠、氧化鋁、聚酰胺、離子交換樹脂、分子篩等，直徑為25～70um。也可以制成化學鍵合固定相，這種固定相的多孔層薄、傳質速率快、柱效高，適用于快速分離；填充均勻緊密、機械強度高、能承受高壓的情況，適合于較簡單的樣品及常規分析；但由于多孔層薄，進樣量受限制。全多孔型固定相由硅膠顆粒凝聚而成，一般制成篩分很窄(1um到幾微米）、顆粒很小（5～10um）的全多孔微球型或非微球型。全多孔型固定相比表面積大，柱容量大，小顆粒全孔型固定相（直徑為10um）孔洞淺，傳質速率仍很快，柱效高，分離效果好，適合于復雜樣品、痕量組分的分離分析，是目前HPLC中應用泛的固定相。

2．流動相

液相色譜中的流動相，也稱溶劑，由洗脫劑和調節劑兩部分組成。前者的作用是將樣品溶解和分離，后者則用以調節洗脫劑的極性和強度，以改變組分在柱中的移動速度和分離狀態。

由于HPLC中流動相是液體，它對組分有親和力，并參與固定相對組分的競爭。因此，正確選擇流動相直接影響組分的分離度。對流動相的基本要求如下。

1)所選用的流動相穩定性好，不與固定相互溶，不發生不可逆作用，不與樣品組分發生化學反應，保持柱效或柱子的保留值性質較長時間不變。

2)擇性好，對待測樣品有足夠的溶解能力，以提高測定的靈敏度。

3)與所用檢測器相匹配，如應用紫外吸收檢測器時，不能用對紫外光有吸收的溶劑。